Patente nacional por "USO DE LA PENTOXIFILINA Y DE UNA COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA PARA ELABORAR UN MEDICAMENTO PARA PREVENIR EL ENVEJECIMIENTO PREMATURO EN HUMANOS"

Reivindicaciones:
+ ES-2589169_A11. Uso de la pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. 2. Uso según la reivindicación 1, caracterizado por que dicho envejecimiento prematuro está causado por un déficit de expresión de la hormona antienvejecimiento Klotho. 3. Uso de una composición farmacéutica que comprende pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. 4. Uso según la reivindicación 3, caracterizado por que dicha composición farmacéutica comprende pentoxifilina y excipientes farmacéuticamente aceptables. 5. Uso según la reivindicación 4, caracterizado por que dichos excipientes farmacéuticamente aceptables están seleccionados del grupo compuesto por ácido esteárico, cera de carnauba, hipromelosa, lactosa, estearato magnésico, acetato de celulosa, triacetina, lactosa, hipromelosa, dióxido de titanio, triacetina, eritrosina, carmín índigo, laca de aluminio, crospovidona, anhidro silícico coloidal, polietilenglicol, talco y poliacrilato.
+ ES-2589169_B1ES 2 589 169 A1 1. Uso de la pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. 2. Uso segun la reivindicacion 1, caracterizado por que dicho envejecimiento prematuro esta causado por un deficit de expresion de la hormona antienvejecimiento Klotho. 3. Uso de una composicion farmaceutica que comprende pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. 4. Uso segun la reivindicacion 3, caracterizado por que dicha composicion farmaceutica comprende pentoxifilina y excipientes farmaceuticamente aceptables. 5. Uso segun la reivindicacion 4, caracterizado por que dichos excipientes farmaceuticamente aceptables estan seleccionados del grupo compuesto por acido estearico, cera de carnauba, hipromelosa, lactosa, estearato magnesico, acetato de celulosa, triacetina, lactosa, hipromelosa, dioxido de titanio, triacetina, eritrosina, carmln Indigo, laca de aluminio, crospovidona, anhidro sillcico coloidal, polietilenglicol, talco y poliacrilato.

Los productos y servicios protegidos por este registro son:
A61K 31/522 - A61P 43/00

Descripciones:
+ ES-2589169_A1 CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un compuesto útil para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. En concreto, dicho compuesto es la pentoxifilina, un inhibidor no selectivo competitivo de la fosfodiesterasa. La pentoxifilina previene la disminución en la expresión de Klotho, una hormona antienvejecimiento. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Klotho es una hormona antienvejecimiento que se expresa en los túbulos celulares del riñón. El déficit genético de Klotho en ratones causa envejecimiento acelerado y muerte por enfermedades asociadas a la vejez en la adolescencia. El riñón es el principal órgano que expresa Klotho. El defecto genético específico de Klotho en ratones y el defecto adquirido de Klotho en la enfermedad renal humana se asocian a envejecimiento acelerado y mortalidad prematura. La inflamación es responsable del descenso de la expresión renal de Klotho. En concreto, la inflamación causada por TNF o TWEAK, citoquinas de la superfamilia del TNF, baja la expresión renal de Klotho. En la actualidad no hay ninguna terapia licenciada que aumente la expresión de Klotho o evite el descenso de la expresión de Klotho. La pentoxifilina es usada en clínica para mejorar el flujo de sangre en pacientes con problemas de circulación para reducir el dolor, calambres y cansancio en las manos y los pies. La pentoxifilina es un inhibidor no selectivo competitivo de la fosfodiesterasa, que plantea cAMP intracelular, activa PKA, inhibe la producción de TNF y la síntesis de leucotrieno, y reduce la inflamación y la inmunidad innata. Además, la pentoxifilina mejora la deformabilidad de los glóbulos rojos de la sangre (conocido como un efecto hemorreológico), reduce la viscosidad de la sangre y disminuye el potencial para la agregación de plaquetas y formación de trombos. La pentoxifilina es también un antagonista de los receptores de adenosina 2. En el documento Moreno, J.A., et al., The inflammatory cytokines TWEAK and TNFa reduce renal klotho expression through NFkB. J Am Soc Nephrol, 2011, Vol. 22, N° 7, páginas 131525 se identifican a las citoquinas inflamatorias TNFalfa y TWEAK como responsables de la disminución de Klotho a través de un mecanismo dependiente de NF-kappaB. Como Klotho es una proteína expresada principalmente en el riñón con propiedades antienvejecimiento, los autores muestran la relación entre la inflamación y las enfermedades caracterizadas por un envejecimiento de los órganos, como enfermedad renal crónica. Varios documentos del estado de la técnica describen distintos efectos de la pentoxifilina, en concreto, efectos antiinflamatorios, efectos de protección renal y efectos de inhibición de las citoquinas TNFalfa. Pero en el estado de la técnica no se describe que la pentoxifilina tenga un efecto de prevención y aumento de la expresión de Klotho ni se describe el uso de la pentoxifilina para prevenir el envejecimiento prematuro debido al déficit de expresión de Klotho. La pentoxifilina ya está en uso en la clínica para otros fines y se ha demostrado su seguridad clínica. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona el uso de la pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos, en adelante uso de la pentoxifilina de la invención. El uso de la pentoxifilina de la invención también se define como pentoxifilina para su uso para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. El uso de la pentoxifilina de la invención también se define como un método para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos, en el que se administra pentoxifilina a humanos. Otra realización es el uso de la pentoxifilina de la invención, donde dicho envejecimiento prematuro está causado por un déficit de expresión de la hormona antienvejecimiento Klotho. La dosis de pentoxifilina que se puede administrar es, por ejemplo, y sin carácter limitante, de 600 a 1200 mg/día, que puede reducirse en función de la presencia de insuficiencia renal o hepática. Otra realización es el uso de una composición farmacéutica que comprende pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos, en adelante uso de la composición farmacéutica de la invención. Otra realización es el uso de la composición farmacéutica de la invención, donde dicha composición farmacéutica comprende pentoxifilina y excipientes farmacéuticamente aceptables. Otra realización es el uso de la composición farmacéutica de la invención, donde dichos excipientes farmacéuticamente aceptables están seleccionados del grupo compuesto por ácido esteárico, cera de carnauba, hipromelosa, lactosa, estearato magnésico, acetato de celulosa, triacetina, lactosa, hipromelosa, dióxido de titanio, triacetina, eritrosina, carmín índigo, laca de aluminio, crospovidona, anhidro silícico coloidal, polietilenglicol, talco y poliacrilato. La presente invención previene el envejecimiento en los seres humanos mediante el mantenimiento de la expresión normal de Klotho. La presente invención previene el envejecimiento en los pacientes que tienen inflamación sistémica de cualquier causa. En la presente invención se ha observado que la albúmina baja la expresión de Klotho en células tubulares renales. Y se ha observado que la pentoxifilina previene la disminución en la expresión de Klotho inducida por la albúmina en las células tubulares renales. La demostración de que la pentoxifilina conserva la expresión de Klotho indica que este inhibidor de la fosfodiesterasa podría usarse clínicamente para conservar la expresión de Klotho en los pacientes. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Figura 1. Prevención de la disminución en la expresión Klotho inducida por la albúmina en las células tubulares renales. Media +/- ESM de tres experimentos independientes. RT-PCR cuantitativa. El eje y representa % incremento de expresión del ARNm de Klotho respecto al control. La concentración de BSA es 10 mg/ml. BSA+Pento 4: concentración de pentoxifilina 4 pg/ml. BSA+Pento 40: concentración de pentoxifilina 40 pg/ml. BSA+Pento 200: concentración de pentoxifilina 200 pg/ml. BSA+Pento 400: concentración de pentoxifilina 400 pg/ml. BSA+Pento 800: concentración de pentoxifilina 800 pg/ml. 3 h significa 3 horas. Figura 2. Prevención de la disminución en la expresión Klotho inducida por la albúmina en las células tubulares renales. Resultados de expresión de proteína Klotho por Western blot. El control se realizó con a-tubulina. MODOS DE REALIZACIÓN PREFERENTE Ejemplo 1. Materiales y métodos Cultivo celular y reactivos Para los estudios in vitro se cultivaron células renales de túbulo proximal de ratón (MCT). Estas células se cultivaron en medio RPMI 1640 (Life Technologies, Grand Island, NY) con 10% de suero bovino fetal inactivado por calor, 2 mM de glutamina, 100 U/mL de penicilina, 100 pg/mL de estreptomicina en una atmósfera con 5% de dióxido de carbono a 37°C. Para los experimentos, el suero bovino fetal fue retirado 24 horas antes de los estudios y durante todo el experimento. Para simular in vitro las condiciones de las nefropatías albuminúricas, se cultivaron las células MCT con albúmina sérica bovina (BSA) a diferentes concentraciones. Estudios de proteínas por Western blot La membrana fue incubada durante toda la noche a 4°C con el anticuerpo anti-Klotho a una dilución 1:500. Tras esto, se lavó la membrana y se incubó con un anticuerpo secundario unido a peroxidasa a una dilución 1:2000 (Amersham, Aylesbury, Reino Unido). El siguiente paso fue incubar la membrana con anti-tubulina a una dilución 1:5000 (Sigma, St. Louis, MO) y su correspondiente anticuerpo secundario. Se ha utilizado la tubulina como control de carga de la técnica. Tras esto, las membranas se revelaron con el método de quimioluminiscencia potenciada (ECL) siguiendo las instrucciones del fabricante (Amersham). Extracción de ARN y reacción inversa de la polimerasa (PCR) El ARN total se extrajo a partir de tejido y de células por el método del reactivo TRI (Sigma) y 1 pg de ARN se transcribió a ADN complementario mediante el kit comercial High Capacity cDNA Archive Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Se usó una sonda para Klotho previamente desarrollada (Applied Biosystems). La PCR cuantitativa se realizó en un termociclador ABI Prims 7500 (Applied Biosystems) de acuerdo con el protocolo del fabricante y utilizando el método de Ct DeltaDELTA. Los niveles de expresión se muestran como relaciones a GAPDH. Ejemplo 2. Prevención de la disminución en la expresión de Klotho inducida por la albúmina en las células tubulares renales. Se cultivaron células tubulares renales según lo descrito en el Ejemplo 1. La albúmina (BSA) 10 mg/ml baja la expresión de ARNm de Klotho en células tubulares cultivadas y la pentoxifilina evita este efecto e incluso, de forma dosis-dependiente aumenta la expresión de Klotho sobre el basal, incluso en presencia de albúmina (Figura 1). A las 24 horas se observa una disminución de proteína Klotho en células tubulares cultivadas en presencia de albúmina (BSA) y 400 pg/ml pentoxifilina evitan este efecto (Figura 2).
+ ES-2589169_B1 USO DE LA PENTOXIFILINA Y DE UNA COMPOSICION FARMACEUTICA PARA ELABORAR UN MEDICAMENTO PARA PREVENIR EL ENVEJECIMIENTO PREMATURO EN HUMANOS CAMPO DE LA INVENCION La presente invention se refiere a un compuesto util para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. En concreto, dicho compuesto es la pentoxifilina, un inhibidor no selectivo competitivo de la fosfodiesterasa. La pentoxifilina previene la disminucion en la expresion de Klotho, una hormona antienvejecimiento. ANTECEDENTES DE LA INVENCION Klotho es una hormona antienvejecimiento que se expresa en los tubulos celulares del rinon. El deficit genetico de Klotho en ratones causa envejecimiento acelerado y muerte por enfermedades asociadas a la vejez en la adolescencia. El rinon es el principal organo que expresa Klotho. El defecto genetico especlfico de Klotho en ratones y el defecto adquirido de Klotho en la enfermedad renal humana se asocian a envejecimiento acelerado y mortalidad prematura. La inflamacion es responsable del descenso de la expresion renal de Klotho. En concreto, la inflamacion causada por TNF o TWEAK, citoquinas de la superfamilia del TNF, baja la expresion renal de Klotho. En la actualidad no hay ninguna terapia licenciada que aumente la expresion de Klotho o evite el descenso de la expresion de Klotho. La pentoxifilina es usada en cllnica para mejorar el flujo de sangre en pacientes con problemas de circulation para reducir el dolor, calambres y cansancio en las manos y los pies. La pentoxifilina es un inhibidor no selectivo competitivo de la fosfodiesterasa, que plantea cAMP intracelular, activa PKA, inhibe la production de TNF y la slntesis de leucotrieno, y reduce la inflamacion y la inmunidad innata. Ademas, la pentoxifilina mejora la deformabilidad de los globulos rojos de la sangre (conocido como un efecto hemorreologico) , reduce la viscosidad de la sangre y disminuye el potencial para la agregacion de plaquetas y formation de trombos. La pentoxifilina es tambien un antagonista de los receptores de adenosina 2. En el documento Moreno, J.A., et al., The inflammator y cytokines TWEAK and TNFa reduce renal klotho expression through NFkB. J Am Soc Nephrol, 2011, Vol. 22, N° 7, paginas 131525 se identifican a las citoquinas inflamatorias TNFalfa y TWEAK como responsables de la disminucion de Klotho a traves de un mecanismo dependiente de NF-kappaB. Como Klotho es una protelna expresada principalmente en el rinon con propiedades antienvejecimiento, los autores muestran la relacion entre la inflamacion y las enfermedades caracterizadas por un envejecimiento de los organos, como enfermedad renal cronica. Varios documentos del estado de la tecnica describen distintos efectos de la pentoxifilina, en concreto, efectos antiinflamatorios, efectos de protection renal y efectos de inhibition de las citoquinas TNFalfa. Pero en el estado de la tecnica no se describe que la pentoxifilina tenga un efecto de prevention y aumento de la expresion de Klotho ni se describe el uso de la pentoxifilina para prevenir el envejecimiento prematuro debido al deficit de expresion de Klotho. La pentoxifilina ya esta en uso en la cllnica para otros fines y se ha demostrado su seguridad cllnica. DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invention proporciona el uso de la pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos, en adelante uso de la pentoxifilina de la invencion. El uso de la pentoxifilina de la invencion tambien se define como pentoxifilina para su uso para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos. El uso de la pentoxifilina de la invencion tambien se define como un metodo para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos, en el que se administra pentoxifilina a humanos. Otra realization es el uso de la pentoxifilina de la invencion, donde dicho envejecimiento prematuro esta causado por un deficit de expresion de la hormona antienvejecimiento Klotho. La dosis de pentoxifilina que se puede administrar es, por ejemplo, y sin caracter limitante, de 600 a 1200 mg/dia, que puede reducirse en funcion de la presencia de insuficiencia renal o hepatica. Otra realization es el uso de una composition farmaceutica que comprende pentoxifilina para elaborar un medicamento para prevenir el envejecimiento prematuro en humanos, en adelante uso de la composicion farmaceutica de la invention. Otra realizacion es el uso de la composicion farmaceutica de la invencion, donde dicha composicion farmaceutica comprende pentoxifilina y excipientes farmaceuticamente aceptables. Otra realizacion es el uso de la composicion farmaceutica de la invencion, donde dichos excipientes farmaceuticamente aceptables estan seleccionados del grupo compuesto por acido estearico, cera de carnauba, hipromelosa, lactosa, estearato magnesico, acetato de celulosa, triacetina, lactosa, hipromelosa, dioxido de titanio, triacetina, eritrosina, carmm indigo, laca de aluminio, crospovidona, anhidro silicico coloidal, polietilenglicol, talco y poliacrilato. La presente invencion previene el envejecimiento en los seres humanos mediante el mantenimiento de la expresion normal de Klotho. La presente invencion previene el envejecimiento en los pacientes que tienen inflamacion sistemica de cualquier causa. En la presente invencion se ha observado que la albumina baja la expresion de Klotho en celulas tubulares renales. Y se ha observado que la pentoxifilina previene la disminucion en la expresion de Klotho inducida por la albumina en las celulas tubulares renales. La demostracion de que la pentoxifilina conserva la expresion de Klotho indica que este inhibidor de la fosfodiesterasa podria usarse clmicamente para conservar la expresion de Klotho en los pacientes. BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS Figura 1. Prevention de la disminucion en la expresion Klotho inducida por la albumina en las celulas tubulares renales. Media +/- ESM de tres experimentos independientes. RT-PCR cuantitativa. El eje y representa % incremento de expresion del ARNm de Klotho respecto al control. La concentration de BSA es 10 mg/ml. BSA+Pento 4: concentration de pentoxifilina 4 pg/ml. BSA+Pento 40: concentracion de pentoxifilina 40 pg/ml. BSA+Pento 200: concentracion de pentoxifilina 200 pg/ml. BSA+Pento 400: concentracion de pentoxifilina 400 pg/ml. BSA+Pento 800: concentracion de pentoxifilina 800 pg/ml. 3 h significa 3 horas. Figura 2. Prevencion de la disminucion en la expresion Klotho inducida por la albumina en las celulas tubulares renales. Resultados de expresion de protelna Klotho por Western blot. El control se realizo con a-tubulina. MODOS DE REALIZACION PREFERENTE Ejemplo 1. Materiales y metodos Cultivo celular y reactivos Para los estudios in vitro se cultivaron celulas renales de tubulo proximal de raton (MCT). Estas celulas se cultivaron en medio RPMI 1640 (Life Technologies, Grand Island, NY) con 10% de suero bovino fetal inactivado por calor, 2 mM de glutamina, 100 U/mL de penicilina, 100 pg/mL de estreptomicina en una atmosfera con 5% de dioxido de carbono a 37°C. Para los experimentos, el suero bovino fetal fue retirado 24 horas antes de los estudios y durante todo el experimento. Para simular in vitro las condiciones de las nefropatlas albuminuricas, se cultivaron las celulas MCT con albumina serica bovina (BSA) a diferentes concentraciones. Estudios de protelnas por Western blot La membrana fue incubada durante toda la noche a 4°C con el anticuerpo anti-Klotho a una dilution 1:500. Tras esto, se lavo la membrana y se incubo con un anticuerpo secundario unido a peroxidasa a una dilucion 1:2000 (Amersham, Aylesbur y , Reino Unido). El siguiente paso fue incubar la membrana con anti-tubulina a una dilucion 1:5000 (Sigma, St. Louis, MO) y su correspondiente anticuerpo secundario. Se ha utilizado la tubulina como control de carga de la tecnica. Tras esto, las membranas se revelaron con el metodo de quimioluminiscencia potenciada (ECL) siguiendo las instrucciones del fabricante (Amersham). Extraction de ARN y reaction inversa de la polimerasa (PCR) El ARN total se extrajo a partir de tejido y de celulas por el metodo del reactivo TRI (Sigma) y 1 pg de ARN se transcribio a ADN complementario mediante el kit comercial High Capacity cDNA Archive Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Se uso una sonda para Klotho previamente desarrollada (Applied Biosystems). La PCR cuantitativa se realizo en un termociclador ABI Prims 7500 (Applied Biosystems) de acuerdo con el protocolo del fabricante y utilizando el metodo de Ct DeltaDELTA. Los niveles de expresion se muestran como relaciones a GAPDH. Ejemplo 2. Prevencion de la disminucion en la expresion de Klotho inducida por la albumina en las celulas tubulares renales. Se cultivaron celulas tubulares renales segun lo descrito en el Ejemplo 1. La albumina (BSA) 10 mg/ml baja la expresion de ARNm de Klotho en celulas tubulares cultivadas y la pentoxifilina evita este efecto e incluso, de forma dosis-dependiente aumenta la expresion de Klotho sobre el basal, incluso en presencia de albumina (Figura 1). A las 24 horas se observa una disminucion de protelna Klotho en celulas tubulares cultivadas en presencia de albumina (BSA) y 400 pg/ml pentoxifilina evitan este efecto (Figura 2).

Publicaciones:
ES2589169 (10/11/2016) - A1 Solicitud de patente con informe sobre el estado de la técnica
ES2589169 (29/08/2017) - B1 Patente de invención
Eventos:
En fecha 06/05/2015 se realizó Registro Instancia de Solicitud
En fecha 06/05/2015 se realizó Admisión a Trámite
En fecha 06/05/2015 se realizó 1001P_Comunicación Admisión a Trámite
En fecha 27/08/2015 se realizó Continuación del Procedimiento
En fecha 02/09/2015 se realizó Publicación Continuación del Procedimiento
En fecha 21/07/2016 se realizó IET1_Petición Realización IET
En fecha 14/09/2016 se realizó Realizado IET
En fecha 16/09/2016 se realizó 1109P_Comunicación Traslado del IET
En fecha 10/11/2016 se realizó Publicación Solicitud
En fecha 10/11/2016 se realizó Publicación Folleto Solicitud con IET (A1)
En fecha 27/02/2017 se realizó Reanudación Procedimiento General de Concesión
En fecha 03/03/2017 se realizó Publicación Reanudación Procedimiento General de Concesión
En fecha 24/05/2017 se realizó Publicación Traslado Observaciones del IET
En fecha 21/08/2017 se realizó Sin Modificación de Reivindicaciones
En fecha 22/08/2017 se realizó Concesión
En fecha 22/08/2017 se realizó 1203P_Notificación Concesión por Procedimiento General de Concesión
En fecha 29/08/2017 se realizó Publicación concesión Patente PGC
En fecha 29/08/2017 se realizó Publicación Folleto Concesión
En fecha 15/09/2017 se realizó Entrega título
Pagos:
21/07/2016 - Pago Tasas IET
13/09/2017 - Pago Tasas Concesión
18/09/2017 - Pago 03 Anualidad
07/06/2018 - Pago 04 Anualidad
07/06/2019 - Pago 05 Anualidad
08/06/2020 - Pago 06 Anualidad
07/06/2021 - Pago 07 Anualidad
02/06/2022 - Pago 08 Anualidad
02/06/2023 - Pago 09 Anualidad