Patente nacional por "Nuevo complejo biomimético antioxidante para la protección integral frente a la radiación solar, método de obtención y estabilización"

Reivindicaciones:
+ ES-2956660_A11. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, caracterizado, por comprender las siguientes fases: a. Cultivo de cianobacterias hasta alcanzar OD750 = 0, 7-0.8 nm, en biorreactor de tanque agitado (600-800 cm3/min de aire estéril, 5.- 75 rpm de agitación, pH 7, 5-8, 25-30°C de temperatura, 16:8-14:10 h de luz: oscuridad con luz natural o 17-25 W/m2 con fluorescente de luz blanca) . b. Exposición a radiación UV-A (4-7 W/m2) y UV-B (1-2 W/m2) durante 6-10 días (8-12 horas al día) para estimular la síntesis de fotoprotectores. c. Centrifugado a más de 5000 g, al menos 15 min, y desecación de la biomasa en estufa a 50°C. d. Extracción por maceración en frio con solvente orgánico durante 16-24 h. e. Centrifugación a más de 8000 g, 15-20 min para eliminación de sólidos y evaporación de disolvente para obtener producto en polvo. 2. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, caracterizado, por la obtención simultánea de sustancias antioxidantes (glutatión y melatonina) por proceso fermentativo de S. cerevisiae y que comprende las siguientes fases: a. Cultivo de levadura durante 48-72 h en melaza diluida (15-20 g/L) y suplementada con glucosa D-glucosa (8-10 g/L) . Trp (0, 5-1 g/L T = 0) , Cys (0, 2-0, 4 g/L, T = 2h) y Glu (1, 5-2, 5 g/L, T = 7h) , en biorreactor de tanque agitado (600-800 cm3/min de aire estéril, 200-300 rpm de agitación, pH 5-6, 25-30°C de temperatura) . b. Filtración del producto resultante por membranas planas porosas. c. Liposomado del extracto rico en antioxidantes. 3. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 1 y 2 caracterizado, por comprender una preparación de un nuevo complejo antioxidante fotoprotector mediante la mezcla del extracto de cianobacterias (enriquecido en escitoneminas) con el extracto de levaduras (enriquecido en glutatión y melatonina) , obtenidos en cualquier proporción, para la protección integral frente a la radiación solar. 4. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 3 caracterizado, por comprender además clorofila a, carotenoides y/o ficobiliproteínas procedentes del extracto de cianobacterias. 5. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 2 caracterizado, por comprender la aplicación de campo magnético de 70-100 pT adicional para maximizar la producción de glutatión y melatonina. 6. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 3 y 4 caracterizado, por comprender la estabilización del complejo antioxidante fotoprotector (reivindicaciones 3 y 4) mediante la solubilización en mezclas de aceites vegetales para su mejor protección frente a procesos de degradación. 7. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 6 caracterizado, por comprender una composición cosmética estabilizada. 8. NUEVO COMPLEJO BIOMIMÉTICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 6 caracterizado, por comprender el uso del complejo antioxidante fotoprotector estabilizado en la preparación de productos cosméticos para la protección de piel humana o cualquier superficie frente a la radiación solar. 9 . NUEVO COMPLEJO BIOMIMETICO ANTIOXIDANTE PARA LA PROTECCIÓN INTEGRAL FRENTE A LA RADIACIÓN SOLAR, MÉTODO DE OBTENCIÓN Y ESTABILIZACIÓN, según reivindicación 8 caracterizado, por comprender la preparación de un producto con actividad antiproliferativa, antitumoral y/o antiinflamatoria.

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+ ES-2956660_A1 Nuevo complejo biomimético antioxidante para la protección integral frente a la radiación solar, método de obtención y estabilización Sector de la técnica La invención propuesta se encuadra dentro de los sectores biotecnológico, cosmético y farmacéutico. Antecedentes de la invención La radiación UV que de forma constante recibe la Tierra en forma de luz ultravioleta (UV) del Sol, resulta ser una fuente de energía vital para los organismos fotoautótrofos, pero la dependencia que estos organismos tienen de la luz solar los hace estar expuestos a radiación UV que puede causar un dar directo o indirecto en su material genético (ADN, ARN) y proteínas, viéndose afectadas funciones biológicas debido a la producción de especies reactivas de oxigeno (ROS) (Fuentes-Tristan et al, 2019) . Esto es debido a que dicha radiación es la más peligrosa del espectro solar al poder atravesar la epidermis y alcanzar la dermis superior. Aunque el ser humano está biológicamente preparado para defenderse del daño causado por la radiación UV (gracias, por ejemplo, al oscurecimiento de la piel por la producción de melanina o de antioxidantes como el glutatión) , en las últimas décadas, y debido al estrechamiento de la capa de ozono por la contaminación atmosférica, la exposición a estos rayos UV dañinos se ha visto aumentada (Milito et al, 2021) . La radiación UV puede inducir daños en el ADN, ARN y las proteínas dependiendo de su longitud de onda. La UV-A causa daños indirectos a través de intermediarios ROS, mientras que la UV-B causa daños tanto directos como indirectos y a veces produce dímeros de pirimidina ciclobutano (CPD) . La exposición a UV-B es potencialmente dañina para todos los organismos vivos, especialmente los que son fotosintéticos. La UV - C es la más dañina de todas, con acción bactericida y bacteriostática y fuerte mutagenicidad, aunque es absorbida en su mayoría por la capa de ozono (Skotarczak et al, 2015) . En los primeros tiempos de la vida en la Tierra, cuando el flujo de radiación UV-B era más acusado que en la actualidad, las formas de vida existentes tuvieron que evolucionar con diferentes mecanismos de defensa frente a dicha radiación. Las fases de la activación de los mecanismos de defensa presentes en microorganismos son (Figura 1) : i. Escape de la radiación UV. La primera línea de defensa consiste en que los microorganismos migran de zonas con altos niveles de radiación UV a zonas donde hay menos, producen barreras físicas como tapetes o costras, cambian su morfología para incrementar el "auto-sombreado" (self-shading) o sintetizan polisacáridos extracelulares. ii. Activación del sistema antioxidante. Cuando el primer mecanismo no es suficiente, la radiación UV alcanza el interior celular produciendo ROS que resultan en estrés oxidativo, Las cianobacterias activan el sistema antioxidante mediante moléculas antioxidantes de dos tipos: a. Enzimáticas: superóxido dismutasa, catalasa y glutatión peroxidasa, ascorbato peroxidasa, mono deshidroascorbato reductasa y glutatión peroxidasa) . b. No enzimáticas: carotenoides, tocoferoles, hidroquinonas, flavonoides, ácido ascórbico y glutatión (GSH) reducido. iii. Producción de compuestos que absorben la radiación UV. Las cianobacterias y otros organismos acuáticos bajo exposición prolongada a radiación UV sintetizan compuestos como aminoácidos de tipo micosporina (MMAs) , escitonemina, 3- hidroxiquinurenina, melanina y pigmentos fluorescentes que protegen de las radiaciones UV-A y UV-B. iv. Mecanismos de reparación del daño celular, como último recurso si los tres mecanismos anteriores fallan. Las proteínas dañadas deben ser re-sintetizadas, mientras que el ADN es reparado mediante mecanismos como la fotorreactivación, escisión de nucleótidos, bypass de dímeros o reparación recombinatoria. La Organización Mundial de la Salud ha establecido una serie de recomendaciones en cuanto a la protección solar, que incluyen: (1) limitar las horas de exposición de 10 a.m. a 4 p.m.; (2) comprobar el índice UV antes de planear actividades de exterior; (3) permanecer bajo estructuras que proyecten sombra, como árboles o sombrillas, durante las horas más intensas de exposición, teniendo en cuenta que esto no provee de protección completa; (4) llevar ropa y accesorios protectores, como gafas y sombreros; (5) utilizar cremas solares; (6) evitar las lámparas de rayos UV. Por tanto, el uso de fotoprotectores está entre estas seis estrategias clave para evitar el daño inducido por radiación UV. La gran mayoría de los protectores solares comercializados contienen filtros de origen mineral y/o sintético. Los filtros físicos (minerales) incluyen nanopartículas de óxido de titanio (TiO2) y óxido de zinc (ZnO) , lo suficientemente grandes para no penetrar en la piel, pero formar una barrera de protección UV en la superficie de ésta. Para lograr este grado de protección se requiere una capa gruesa de estos filtros, lo que deja una capa blanca sobre la piel, además de poder ser comedogénico (provocar imperfecciones por la obstrucción de los poros de la piel) . Por otro lado, se encuentran los filtros químicos diseñados para absorber la radiación UV y disiparla en forma de calor, como son benzofenona-3 (oxibenzona) , octocrileno y metoxicinamato de octilo (octinoxato) , muy eficientes en la protección de la piel frente a los daños UV. Sin embargo, tienen un fuerte impacto en el medioambiente ya que han demostrado tener una alta persistencia y dispersión en el medio marino y en distintas fuentes de agua. Entre otros problemas de los filtros físicos y químicos encontramos la dermatitis, reacciones alérgicas, penetración y absorción en la dermis (algunas sustancias de bajo peso molecular como el ácido p-aminobenzoico, PABA) , inhibición del eritema (asociada a un mayor tiempo de exposición a la radiación UV) , potencial inhibición de la síntesis de la vitamina D3 (con el consecuente riesgo de enfermedad cardiovascular y melanoma) y la discutida penetrabilidad en la piel de nanopartículas de pequeño tamaño, pudiendo ocasionar mutaciones en el ADN bajo la influencia de luz UV (Skotarczak et al, 2015) . La oxibenzona y el octinoxano, además, pueden absorberse y pasar a la circulación sistémica en cantidades lo suficientemente elevadas come para requerir más estudios sobre su posible bioseguridad, y varios estudios los han relacionado con alteraciones en el desarrollo fetal y reportado su actividad como disruptores endocrinos en ensayos in vitro, aunque está por determinar si tienen efectos negativos en humanos a largo plazo (Suh et al, 2020) . No obstante, los consumidores cada vez son más conscientes de la procedencia de los productos que utilizan, si son de origen sintético o natural y si son eco-friendly y sostenibles. A pesar de saber que las cremas solares son una importante herramienta en la lucha contra el cáncer de piel, sus formulaciones necesitan mejorarse para que contengan ingredientes más seguros y hacerlos más resistentes al agua, especialmente en vista de las preocupaciones planteadas sobre la posible ecotoxicidad de algunos protectores solares para el medioambiente marino, así como a la salud humana. Por ejemplo, a partir del 1 de enero de 2021, algunos protectores solares que contienen filtros sintéticos UV como la xibenzona y octinoxato han sido prohibidos en Hawái por su presunto daño a los arrecifes de coral y la vida marina. Estos filtros UV, junto con otros, también han sido objeto de escrutinio por su posible toxicidad en relación con la reproducción y el desarrollo de varios organismos. Por lo tanto, descubrir y aprobar nuevos compuestos de protección solar con menos inconvenientes y de origen natural podría aliviar estas preocupaciones cada vez más crecientes y aumentar el uso de protectores solares. Recurrir a la naturaleza para reemplazar los productos químicos sintéticos es una tendencia creciente tanto en el sector cosmético como en el farmacéutico, donde hay un aumento en la demanda de alternativas válidas de origen natural. En este contexto, recientemente se ha prestado atención a los productos químicos fotoprotectores producidos por microorganismos fotosintéticos, con mecanismos de defensa seleccionados de forma natural gracias a millones de años de evolución por exposición prolongada a estas radiaciones. De hecho, la enorme biodiversidad de estos organismos, tanto marinos como de agua dulce, representa una fuente de compuestos con actividad protectora frente a radiación UV que se producen de forma natural, los cuales se pueden utilizar para aplicaciones cosmecéuticas como alternativas ecológicas y más seguras a los filtros UV sintéticos (Milito et al, 2021) . Las cianobacterias (también algas verdeazuladas, algas cianófitas o cianofíceas) son el grupo más primitivo de procariotas fotosintéticos Gram negativos que han evolucionado con oxígeno. Aparecieron en la Tierra durante la era Precámbrica (hace entre 2800 y 3500 millones de años) , cuando todavía no se habla formado la capa de ozono, Por tanto, de su actividad fotosintética se creó un ambiente oxigénico que permitió la evolución de la vida existente. Son de naturaleza ubicua, encontrándose tanto en aguas termales como en las regiones polares, y son un gran productor de biomasa tanto en ecosistemas acuáticos como terrestres. Estas bacterias contribuyen a la fijación del nitrógeno y el flujo del carbono (son nitrificantes y fotoautótrofas, aunque también las hay que viven heterotróficamente, como descomponedoras o con un metabolismo mixto) , y en sus ambientes naturales producen pigmentos para utilizar de forma eficiente la luz solar disponible, como clorofila a y ficobiliproteínas, encontrándose coloraciones que van desde el verde hasta el pardo-rojizo e incluso morado. También se caracterizan por su estructura simple y sus mínimos requerimientos nutricionales. Pueden aparecer de forma unicelular cocoide, o a veces agregadas en una vaina mucilaginosa formando filamentos simples o tricomas (filamentosas) . En los últimos años, las cianobacterias han atraído la atención por su capacidad de producir varios metabolitos secundarios bioactivos de interés industrial, con valor para medicina y agricultura. Las escitoneminas son pigmentos alcaloides pardo-amarillentos con una conocida actividad de absorción de luz ultravioleta con un papel esencial en la fotoprotección de las propias cianobacterias. Al contrario que otros fotoprotectores como los MMAs, las escitoneminas son sintetizadas exclusivamente por cianobacterias, La escitonemina es un compuesto dimérico y liposoluble, localizado en la vaina polisacarídica de algunas cianobacterias (más de 300 especies) , que actúan como protectores solares pasivos contra la radiación UV. Contiene subunidades indólicas y fenólicas ensambladas en lo que se conoce como "esqueleto de escitonemano. Existe en forma oxidada (544 Da) o reducida (546 Da) , dependiendo de las condiciones redox y ácido-base durante el proceso de extracción, y recientemente se han descrito cuatro formas derivadas en diferentes organismos: dimetoxiescitonemina, tetrametoxiescitonemina, escitonina, escitonemina-3a-imina (Figura 2) . La escitonemina purificada tiene un máximo de absorción UV a 384 ± 2 nm, aunque también tiene una absorbancia significativa a 252, 278 y 300 nm. Por tanto, es capaz de bsorber fuertemente en la región UV-A (315-400 nm) , extendiendo su absorbancia a la zona violeta y azul, así como en las regiones UV- B (280-320 nm) e incluso UV-C (190-280 nm) (Rastogi et 1, 2013) . Por tanto, ejerce su mecanismo de protección absorbiendo la radiación UV del espectro solar y disipando la energía mediante des-excitación térmica inocua. Estudios previos han reportado que la escitonemina puede prevenir hasta el 90% de la radiación UV incidente de entrar a la célula. En cuanto a su empleabilidad industrial, la escitonemina tiene un gran potencial tanto cosmético (por sus ya mencionadas capacidades de disipación de la radiación UV) como farmacológico, con interesantes propiedades antiinflamatorias, antioxidantes y antiproliferativas, no resultando tóxica para las células en concentraciones de hasta 10 qM. La estabilidad de un compuesto es crucial para su uso final en la industria cosmética o farmacéutica, en el desarrollo de medicina clínica o productos solares, y la escitonemina es un metabolito secundario altamente estable bajo diferentes condiciones de estrés abiótico, como radiación UV, calor o estrés oxidativo (Rastogi et al, 2015) . Por otro lado, la activación del sistema antioxidante endógeno de las propias células también es un factor por el cual protegerse de la radiación UV. De esta misma manera, el aporte exógeno de sustancias con actividad antioxidante (que posee la ya descrita escitonemina) puede mejorar los mecanismos de defensa naturalmente encontrados en las células de la piel. Dos compuestos antioxidantes de gran importancia para mantener las condiciones redox intracelulares son el glutatión y la melatonina. El glutatión juega un rol importante en la respuesta al estrés oxidativo y nutricional. Es el compuesto tiólico no proteico más abundante y ubicuo encontrado más ampliamente en organismos procariotas y eucariotas. Estructuralmente es un tripéptido compuesto de L-glutamato (Glu) , L-cisteina (Cys) y L-glicina (Gly) , y su grupo activo es representado por el tiol (grupo -SH) del residuo de Cys (Figura 3) . El glutatión existe en su forma tiol-reducida (GSH) y disulfuro-oxidada (GSSG) . El contenido en GSH es más del 98% del glutatión total de la célula, y es sintetizado intracelularmente en dos pasos dependientes de energía por la unión de sus tres aminoácidos precursores, llevada a cabo por dos enzimas. El GSH está involucrado en múltiples funciones biológicas en varios tejidos, principalmente propiedades redox y nucleofílicas: reacciones biorreductivas, procesos de transporte, actividad enzimática y metabolismo del nitrógeno y azufre, protección contra estrés oxidativo, detoxificación de xenobióticos y metabolitos tóxicos endógenos, así como modulación de la proliferación celular, apoptosis, función inmunitaria y fibrogénesis. Estas características lo convierten en una molécula con utilidad terapéutica, y es utilizado ampliamente para el tratamiento de diversas enfermedades como infecciones por VIH, inflamaciones pancreáticas, cirrosis hepática y envejecimiento (Tahmasebi et al, 2016) . Es gracias a su capacidad antioxidante que tiene un rol importante en la protección frente a la radiación UV, debido tanto a su propia acción reparadora del daño oxidativo como a la capacidad para donar átomos de hidrógeno a otros antioxidantes presentes en la célula (como el ascorbato) y activar vías de protección secundarias. El uso de antioxidantes endógenos tiene un interés especial en fotoprotección, ya que se evita la aplicación de sustancias extrañas en la piel, y los estudios previos realizados con mezclas de antioxidantes han mostrado resultados más prometedores que los que emplean una única sustancia (lo que puede tener incluso efectos deletéreos para la célula) . De ahí el interés de emplear el glutatión por su capacidad de estimular otros sistemas antioxidantes endógenos, y además de aplicarlo en combinación con otras moléculas antioxidantes. La melatonina (N-acetil-5-metoxiltriptamina) es una indolamina encontrada en plantas, microorganismos y humanos. En estos últimos es producida en la glándula pineal o epífisis a artir del triptófano (Trp) . Presenta un anillo de tipo indólico y dos grupos funcionales principales, un grupo metoxi en posición 5 y un grupo amida en posición 3 (Figura 4) . Estos grupos determinan su solubilidad tanto en medio acuoso como en orgánico, su carácter anfipático le permite traspasar las membranas celulares y ser transportada por fluidos biológicos, además de ser responsables de sus propiedades antioxidantes. Modula muchos procesos fisiológicos incluyendo el ciclo del sueño/vigilia y la fisiología reproductiva, además de actuar como antioxidante. La melatonina protege del estrés oxidativo de forma directa (actuando como donador de electrones e interaccionando con ROS) e indirecta (activando enzimas antioxidantes y regulando su expresión génica) . Esta capacidad le confiere propiedades fotoprotectoras al reparar el daño que genera el ambiente oxidativo causado por la radiación UV, que han sido comprobadas en estudios previos (Skobowiat et al, 2018) . Saccharomyces cerevisiae ("hongo del azúcar de la cerveza", en griego latinizado) es una de las levaduras (hongos unicelulares) más utilizadas en la industria, además de ser un organismo eucariota modelo para estudios biológicos por sus sencillas condiciones de cultivo y su rápido crecimiento (su tiempo de duplicación es de 90 minutos) . Este organismo lleva a cabo la fermentación alcohólica, el tipo más común de fermentación (obtención de energía mediante oxidación incompleta de moléculas glucídicas) . Actualmente se están empleando métodos enzimáticos y fermentativos para producir GSH a escala industrial, siendo el último método el más eficiente. Esto se debe a que ciertas cepas de levaduras, en particular de S. cerevisiae y Candida utilis, tienen la capacidad de acumular grandes cantidades de GSH en las células (Ahmasebi et al, 2016) . Estudios previos han mostrado que S. cerevisiae puede sintetizar grandes cantidades de melatonina y otros metoxi-indoles durante su crecimiento estándar, así como en procesos de fermentación alcohólica (Rodríguez-Naranjo et al, 2012) . La ventaja de la fermentación como método de obtención de metabolitos secundarios es que pueden concentrarse en gran medida las sustancias de interés optimizando el proceso y empleando materiales de bajo coste como sustratos. Descripción detallada de la invención La presente invención presenta una composición que incluye extractos de escitoneminas, glutatión y melatonina para una protección solar completa por dos mecanismos: disipación de la radiación UV en forma de calor mediante el uso de moléculas fotoprotectoras naturales (escitonemina) y reparación del daño celular mediado por ROS gracias a la acción de los compuestos antioxidantes. Las escitoneminas empleadas en la composición son obtenidas de cianobacterias previamente aisladas de lagunas de alta montaña (a partir de 2800 metros de altitud, 37°01'N, 3°16'W - 37°04'N, 3°19'W) , en zonas con una gran incidencia de radiación UV, y cultivadas en el laboratorio de forma biomimética. Los microorganismos que crecen en estos ecosistemas están evolutivamente adaptados a la radiación y son una fuente natural de compuestos fotoprotectores. El cultivo de cianobacterias empleado consiste en un consorcio de organismos de picocianobacterias pertenecientes al orden Synechococcales (92% de cianobacterias) de los géneros Synechococcus (77%) , Cyanobium (7%) y Prochlorococcus (2%) , con trazas de Leptolyngbyaceae y otros organismos muy minoritarios. Las cianobacterias son cultivadas en biorreactor tipo tanque agitado que mantiene las condiciones ideales para su crecimiento, y posteriormente sometidas a estrés por incidencia de radiación UV-A y UV-B para estimular las condiciones naturales de producción de escitoneminas, de manera similar a como ocurre en el medio natural (proceso biomimético) . Posteriormente se extrae el contenido celular usando solventes orgánicos y se lleva a sequedad, obteniéndose un producto en polvo rico en escitoneminas acompañadas de clorofila a, carotenoides y ficobiliproteínas. Otros compuestos antioxidantes de la composición de la presente invención, tanto melatonina como el glutatión, son producidos de forma fermentativa por la levadura Saccharomyces cerevisiae, cultivada en biorreactor de tanque agitado usando como sustrato melaza de remolacha (un subproducto de la industria azucarera de bajo coste) . El cultivo debe ser suplementado, además, con los aminoácidos precursores limitantes en el proceso de síntesis (Glu, Cys y Trp) para maximizar el rendimiento. Posteriormente se obtiene un extracto rico en glutatión y melatonina tras un proceso de purificación, concentración y aislamiento de dichos activos mediante una secuencia de filtración en membranas. Este ingrediente concentrado es posteriormente encapsulado en liposomas para poderlo incorporar a la matriz cosmética final durante el proceso de fabricación. Por primera vez se presenta una composición con capacidad fotoprotectora compuesta por dos familias de moléculas que actúan a varios niveles (disipación de la radiación UV y actividad antioxidante de prevención/reparación del daño celular) para una protección integral frente a la radiación solar. Los filtros solares son obtenidos de forma biomimética de un consorcio de cianobacterias seleccionado evolutivamente debido a su ambiente hostil (lagunas de alta montaña con gran incidencia UV) para la resistencia a dicha radiación, mientras que los antioxidantes proceden tanto del proceso anterior como de levaduras capaces de producirlos y acumularlos de manera natural. Descripción de los dibujos Para complementar la descripción que se está realizando y con objeto de ayudar a una mejor comprensión de las características de la invención propuesta de acuerdo con un ejemplo preferente de realización práctica que se expone como parte integrante de la descripción unas figuras que representan e identifican elementos de la invención, que, con carácter ilustrativo y no limitativo se representan las siguientes: Figura 1. Efectos de la radiación UV en diversos organismos fotoautótrofos como cianobacterias, y consiguiente adopción de mecanismos de defensa para contrarrestar los efectos dañinos de la radiación UV. Figura 2. Familia de las escitoneminas. (a) Escitonemina reducida, (b) escitonemina oxidada, (c) tetrametoxiescitonemina, (d) dimetoxiescitonemina, (e) escitonina, (f) escitonemina-3a-imina. Imagen extraída de Grant & Louda, 2013. Figura 3. Estructura del glutatión. Glutatión reducido (GSH, superior) y oxidado (GSSG, inferior) . Figura 4. Estructura de la melatonina. Modo de realización de la invención El modo de realización a escala de laboratorio de la presente composición cosmética puede resumirse en los siguientes pasos: Producción de escitoneminas 1) A partir de un precultivo de cianobacterias ya crecido (OD750 = 0, 7 - 0, 8 nm) , inocular al 10-20% un biorreactor de tipo tanque agitado de 2 L esterilizado en autoclave (Biostat A) con 1, 5 L de medio de cultivo BG-11. 2) Crecer el cultivo hasta obtención de una OD750 = 0, 7 - 0, 8 nm con burbujeo constante de aire estéril (600-800 cm3/min) , agitación de palas a 50-75 rpm, monitorización continua de pH (valores entre 7, 5-8) , 25-30 °C de temperatura y un ciclo de luz oscuridad de 16:8 o bien 14-10 horas con luz natural o lámparas fluorescentes de luz blanca (irradiación de 17-25 W/m2) . 3) Pasado el tiempo de crecimiento, iluminar el cultivo entre 8-12 horas al día con lámparas fluorescentes de luz UV-A (4-7 W/m2) y UV-B (1 - 2 W/m2) durante un periodo de 6-10 días. 4) Centrifugar el cultivo por encima de 5000 g durante al menos 15 minutos para eliminar el medio de cultivo y secar la biomasa a 50 °C. 5) Realizar la extracción de escitoneminas y pigmentos por maceración en frío con acetona durante 16-24 horas (ovemight) . 6) Centrifugar el extracto a velocidad superior a 8000 g. 15-20 min, para eliminar sólidos residuales. Opcionalmente puede filtrarse por una membrana de 0, 22 m. 7) Evaporar el solvente orgánico en un baño termostatizado y recoger el producto sólido resultante. Conservar en frio en un envase protegido de la luz. Producción simultánea de glutatión y melatonina 1) En un biorreactor de tipo tanque agitado 2 L esterilizado en autoclave (Biostat A) , inocular un 7% de S. cerevisiae en medio melaza diluida (15-20 g/L de azúcares) , suplementada con D- glucosa (8-10 g/L) y aminoácidos precursores, añadidos a diferentes tiempos: Trp (0, 5-1 g/L) al tiempo de inoculación (T = 0) Cys (0, 2 - 0, 4 g/L) a las 2 horas de inoculación (T = 2h) y Glu (1, 5- 2, 5 g/L) a las 7 horas de inoculación (T = 7h) . 2) Mantener el cultivo con burbujeo constante de aire estéril (600-800 cm3/min) , agitación de palas a 200-300 rpm, ajuste automático de pH a 5-6 y 25-30°C de temperatura, durante 48-72 horas. 3) Para obtener una mayor cantidad de GSH se recomienda la aplicación de un campo magnético de 70-100 pT mediante un solenoide colocado alrededor del biorreactor con entre 8-12 vueltas, 0, 7 - 1, 2 V y 3-4 A. 4) Seguidamente, concentrar los activos (glutatión y melatonina) mediante membranas: a. La secuencia de filtración comienza con una filtración en doble etapa por membranas de 50000 Da para separar la biomasa celular. b. A continuación, conducirlo a una secuencia lineal de filtración por membranas de 1 kDa y 150-300 Da para maximizar la recuperación de glutatión y melatonina. c. Se obtiene un líquido transparente de color marrón oscuro que se conserva en frio. Liposomado del extracto concentrado de glutatión y melatonina Fórmula del producto liposomado: 1) Atemperar a 40 °C los componentes de la fase B y agitar hasta mezcla homogénea. 2) Incorporar el complejo botánico fuente de ceramidas al concentrado obtenido por membranas (fase A) a la vez que se agita en batidora (10000-12000 rpm) . 3) Agitar en rotor-estator (Ultra-Turrax, 10000-12000 rpm) la fase A y. sobre el vórtice, verter lentamente la fase B, manteniendo la agitación durante 5 min. 4) Añadir fase C. 5) Remover con agitación de palas durante 15-20 min. Estabilización de complejo fotoprotector La estabilización del complejo antioxidante fotoprotector se realiza mediante solubilización en diferentes aceites de origen vegetal con capacidad fotoprotectora endógena. Entre ellos, aceita de semilla de zanahoria (SPF 6, 92 a 18, 80) , aceite de almendras (SPF 4, 6) aceite de coco (SPF 1, 75 a 7, 36) , aceite de jojoba (SPF 4) , etc. Ejemplos: Mezcla 1: Extracto procedente de cultivo de cianobacterias (escitoneminas) 0, 01-10% Prunus Amygdalus Dulcis Oil 1-50% Simmondsia chinensis seed oil csp 100 Mezcla 2: Extracto procedente de cultivo de cianobacterias (escitoneminas) 0, 01-10% Daucus Carota Seed Oil 1-50% Prunus Amygdalus Dulcis Oil 1-50% Simmondsia chinensis seed oil csp 100 Mezcla 3: Extracto procedente de cultivo de cianobacterias (escitoneminas) 0, 1-10% Cocos Nucifera Oil 1-30% Daucus Carota Seed Oil 1-30% Prunus Amygdalus Dulcís Oil 1-30% Simmondsia chínensís seed oil csp 100 Mezcla 4: Extracto procedente de cultivo de cianobacterias (escitoneminas) 0, 01-10% Extracto procedente de fermentación de levaduras (glutatión y melatonina) 0, 01-20% Prunus Amygdalus Dulcis Oil 1-50% Simmondsia chinensis seed oil 1-50% Sistema emulgente W/O agua en aceite 0-5% Agua csp 100 Mezcla 5: Extracto procedente de cultivo de cianobacterias (escitoneminas) 0, 01-10% Extracto procedente de fermentación de levaduras (glutatión y melatonina) 0, 01-20% Daucus Carota Seed Oil 1-40% Prunus Amygdalus Dulcis Oil 1-40% Simmondsia chinensis seed oil 1-40% Sistema emulgente W/O agua en aceite 0-5% Agua csp 100 Mezcla 6: Extracto procedente de cultivo de cianobacterias (escitoneminas) 0, 01-10% Extracto procedente de fermentación de levaduras (glutatión y melatonina) 0, 01-20% Cocos Nucifera Oil 1-30% Daucus Carota Seed Oil 1-30% Prunus Amygdalus Dulcís Oil 1-30% Simmondsia chínensís seed oil 1-30% Sistema emulgente W/O agua en aceite 0-5% Agua csp 100 Las composiciones anteriores se emplearán en la preparación de otros productos cosméticos para la protección de piel humana o cualquier superficie frente a la radiación solar. No se considera necesario hacer más extensa la presente memoria descriptiva para que cualquier experto en la materia comprenda el alcance de la invención y las ventajas que de su uso se derivan. Los términos en que se ha escrito la presente memoria deberán ser tomados siempre con carácter ilustrativo y no limitativo.

Publicaciones:
ES2956660 (26/12/2023) - A1 Solicitud de patente con informe sobre el estado de la técnica
Eventos:
En fecha 20/05/2022 se realizó Registro Instancia de Solicitud
En fecha 24/05/2022 se realizó Admisión a Trámite
En fecha 24/05/2022 se realizó 1001P_Comunicación Admisión a Trámite
En fecha 21/06/2022 se realizó Superado examen de oficio
En fecha 31/03/2023 se realizó Realizado IET
En fecha 03/04/2023 se realizó 1109P_Comunicación Traslado del IET
En fecha 26/12/2023 se realizó Publicación Solicitud
En fecha 26/12/2023 se realizó Publicación Folleto Solicitud con IET (A1)
En fecha 10/04/2024 se realizó Validación petición y/o pago de examen sustantivo no conforme
En fecha 10/04/2024 se realizó Retirada
En fecha 10/04/2024 se realizó 1108P_Notificación retirada solicitud por no petición y/o pago de examen sustantivo
En fecha 16/04/2024 se realizó Publicación retirada solicitud por no petición y/o pago de examen sustantivo
Pagos:
20/05/2022 - Pago Tasas IET